当前位置:k8凯发-凯发k8国际娱乐官网入口 > 技术文章 > 耗材专区 | ezsep™wax固相萃取柱应用于肉制品中合成着色剂的检测
前言
gb 5009.35-2023食品中合成着色剂的测定标准将于2024-03-06起实施,本次标准修订在现有检测方法的基础上,扩充了能够检测的食品基质类型和着色剂种类,覆盖了gb 2760-2014中规定的11种合成着色剂(分别为柠檬黄、新红、菜红、蓝、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝、唾咻黄、赤藓红和酸性红),以及允许添加的所有基质大类中的25种典型基质。同时前处理方法也由聚酰胺粉变更为wax混合型弱阴离子交换反相吸附或等效固相萃取柱。
本实验参考标准《gb 5009.35-2023 食品安全国家标准 食品中合成着色剂的测定》,使用ezsep™wax固相萃取柱净化样品,再通过e.t.氮吹浓缩仪浓缩,高效液相色谱进行检测,建立了肉制品中合成着色剂的分析方法。
1、实验过程
1.1 仪器与试剂
lc-20ad液相色谱仪,岛津企业管理(中国)有限公司;
mprep-spe08手动固相萃取装置,货号:pz0008,北京莱伯帕兹检测科技有限公司;
e.t.氮吹浓缩仪,货号:c020017,北京莱伯帕兹检测科技有限公司;
ezsep™wax固相萃取柱(150mg/6ml),货号:pz12103,北京莱伯帕兹检测科技有限公司;
冷冻离心机,gl-20g-ⅱ,上海安亭科学仪器厂;
甲醇(色谱纯),购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司;
甲酸,氨水,无水乙醇,乙酸铵,等化学品均为分析纯或以上,购自国药集团化学试剂有限公司;
水中11种色素混标,100μg/ml,坛墨质检科技股份有限公司。
1.2 工作液配制
取色素混合标准溶液1ml,用水稀释至10ml容量瓶中,配制成浓度为10μg/ml的色素混标中间液。
移取10μg/ml的色素混标中间液0.02、0.05、0.1、0.2、0.5、1.0ml,分别用水稀释至1.0ml容量瓶中,得到浓度依次为0.2、0.5、1、2、5、10μg/ml的标准系列工作液。
1.3 实验部分
准确称取试样2.0g,置于50ml具塞离心管中,先加入20ml石油醚,涡旋1min,超声提取10min,10000r/min离心5min,弃去上清液,加入25ml乙醇氨水溶液,50℃超声提取20min,10000r/min离心10min,取上清液置于50ml容量瓶中,每次加入约5ml乙醇氨水溶液重复提取操作四次,离心后合并上清液于50ml容量瓶中,用乙醇氨水溶液定容至刻度即得提取液。准确吸取提取液10ml,50℃氮气浓缩至3ml左右,分3次共加入10ml5%甲醇水溶液溶解,作为待净化液,待净化。
将ezsep™wax固相萃取柱(150mg/6ml,货号:pz12103)依次用6ml甲醇、6ml水活化后,取1.3.1待净化液上样,上样结束后再依次用6ml2%甲酸水溶液、6ml甲醇淋洗固相萃取柱,之后用氮气吹干萃取柱2min,以6ml 2%氨化甲醇溶液洗脱并收集洗脱液,经e.t.氮吹浓缩仪在50℃下氮气浓缩至近干,再加0.2ml甲醇,用0.02mol/l乙酸铵稀释至2.0 ml,涡旋1min,ptfe微孔滤膜过滤,高效液相色谱测定。
1.4 lc分析
色谱柱:c18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)
流动相:a:0.02mol/l乙酸铵溶液 b:甲醇;
流速:1.0ml/min
检测波长:415nm、520nm、610nm
进样量:10μl
表1 流动相梯度洗脱表
2、 实验结果
表2 加标回收率结果
图1 1.0μg/ml混标色谱图
图2 样品加标色谱图
图3 空白样品色谱图
3、结论
本实验使用ezsep™wax固相萃取柱(150 mg/6ml,货号:pz12103,北京莱伯帕兹检测科技有限公司)对肉制品中合成着色剂进行净化后测定,该方法的加标回收率在62.2%~95.0%之间,rsd在0.5%~3.9%之间。准确性和精密度均满足gb 5009.35-2023要求,且实验方法稳定、可靠。
4、参考文献
[1] gb 5009.35-2023 食品安全国家标准 食品中合成着色剂的测定